Le s\u00e9quen\u00e7age de l'ADN fait r\u00e9f\u00e9rence au processus de d\u00e9termination de l'ordre pr\u00e9cis des nucl\u00e9otides au sein d'une mol\u00e9cule d'ADN. Cela implique l'identification de l'ordre des quatre bases (ad\u00e9nine, guanine, cytosine et thymine) qui constituent les barreaux de la structure en double h\u00e9lice de l'ADN.<\/p>\n
Les bases du s\u00e9quen\u00e7age de l'ADN ont \u00e9t\u00e9 pos\u00e9es au d\u00e9but du XXe si\u00e8cle avec l'\u00e9lucidation de la structure mol\u00e9culaire de l'ADN par James Watson et Francis Crick en 1953. Cependant, la technique de s\u00e9quen\u00e7age elle-m\u00eame n'a \u00e9t\u00e9 d\u00e9velopp\u00e9e qu'\u00e0 la fin des ann\u00e9es 1970. Deux m\u00e9thodes principales \u2013 le s\u00e9quen\u00e7age Sanger d\u00e9velopp\u00e9 par Frederick Sanger et ses coll\u00e8gues, et le s\u00e9quen\u00e7age Maxam-Gilbert d\u00e9velopp\u00e9 par Allan Maxam et Walter Gilbert \u2013 ont men\u00e9 la premi\u00e8re r\u00e9volution dans ce domaine. Les deux m\u00e9thodes ont \u00e9t\u00e9 publi\u00e9es pour la premi\u00e8re fois en 1977 et, pour leurs contributions, Sanger et Gilbert se sont partag\u00e9 le prix Nobel de chimie en 1980.<\/p>\n
Le s\u00e9quen\u00e7age de l\u2019ADN est crucial pour comprendre la constitution g\u00e9n\u00e9tique des organismes. Il permet aux scientifiques d'\u00e9tudier comment les g\u00e8nes interagissent les uns avec les autres et comment ils influencent les caract\u00e9ristiques de l'organisme. Le s\u00e9quen\u00e7age de l'ADN implique une cha\u00eene de r\u00e9actions pour r\u00e9pliquer le segment d'ADN d'int\u00e9r\u00eat et d\u00e9terminer l'ordre des nucl\u00e9otides.<\/p>\n
Essentiellement, le s\u00e9quen\u00e7age de l\u2019ADN repose sur les principes d\u2019appariement de bases compl\u00e9mentaires (ad\u00e9nine avec thymine et cytosine avec guanine), de r\u00e9plication de l\u2019ADN et de m\u00e9thodes de d\u00e9tection (souvent des terminateurs marqu\u00e9s par fluorescence) pour identifier l\u2019ordre des nucl\u00e9otides.<\/p>\n
La s\u00e9quence d'ADN est une cha\u00eene de nucl\u00e9otides, chacun constitu\u00e9 d'un sucre, d'un phosphate et d'une des quatre bases. La s\u00e9quence est lue de l\u2019extr\u00e9mit\u00e9 5\u2019 \u00e0 l\u2019extr\u00e9mit\u00e9 3\u2019, correspondant \u00e0 la direction du brin d\u2019ADN en croissance lors de la r\u00e9plication.<\/p>\n
Le fonctionnement du s\u00e9quen\u00e7age de l\u2019ADN d\u00e9pend de la terminaison diff\u00e9rentielle du processus de r\u00e9plication. Dans le s\u00e9quen\u00e7age Sanger, par exemple, le processus incorpore des did\u00e9soxynucl\u00e9otides de terminaison de cha\u00eene qui arr\u00eatent l'extension du brin d'ADN, permettant ainsi l'identification du nucl\u00e9otide terminal.<\/p>\n
Il existe plusieurs types de m\u00e9thodes de s\u00e9quen\u00e7age de l'ADN. En voici quelques-uns cl\u00e9s\u00a0:<\/p>\n